断奶是仔猪生长发育过程中的关键时期,处于此阶段的仔猪一方面要面对着自身消化器官发育不完全等问题,另一方面要面对外界环境及饲料的巨大变化,这些刺激可能会让仔猪出现短暂性厌食、肠道炎症以及肠道菌群失调等情况,导致仔猪断奶腹泻的发生。而在此阶段,产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引发仔猪断奶腹泻的主要病原微生物之一,其会通过在断奶仔猪肠道中大量增殖打破仔猪肠道菌群平衡诱发仔猪继发性感染,同时ETEC分泌的热不稳定毒素和热稳定毒素会进一步破坏肠上皮细胞渗透压平衡,加剧机体肠道屏障功能损伤,引起仔猪出现分泌性腹泻症状并影响生长性能。为了预防仔猪断奶后腹泻,生产上常会在日粮中添加抗生素或高剂量的氧化锌,然而饲料中添加抗生素及氧化锌可能会引起耐药性增加、药物残留以及环境中矿物质积累过量等问题。因此,需要找到能缓解断奶仔猪腹泻的抗生素或氧化锌的替代品。已有较多的研究表明LPL能够起到提高动物消化率,改善动物机体健康,促进动物生长的作用。然而,LPL是否可以在仔猪感染致病菌的条件下,发挥其改善动物机体健康的作用还需要进一步的研究。基于此,本试验以断奶仔猪为试验动物,在仔猪日常饲粮中添加LPL,研究在正常饲养条件LPL对仔猪生长性能及腹泻情况的影响。同时,构建ETEC攻毒仔猪模型,在此基础上考察LPL对ETEC感染仔猪生长性能、免疫功能及肠道健康的影响,以期为营养改善断奶仔猪腹泻问题提供参考资料。
试验技术设计
本试验通过在断奶仔猪饲粮中添加溶血磷脂(Lysophospholipid,LPL),研究其在正常饲养条件下对断奶仔猪生长性能的影响,以及在感染产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC)条件下对仔猪生长性能、免疫功能和肠道健康的影响。本次试验选取32头体重相近的健康25日龄DLY断奶仔猪(7.24±0.07kg),根据体重相近原则,将断奶仔猪随机分为 4 个处理,分别为CON组(基础饲粮)、CON+ETEC组(ETEC,基础饲粮)、LPL 组(基础饲粮+0.3%LPL)、ETEC+LPL组(基础饲粮+0.3%LPL,ETEC),每个处理8个重复,每个重复1头断奶仔猪,进行单笼饲养。正式试验期为21d,试验第19d,CON+ETEC组、LPL+ETEC组每只断奶仔猪灌胃400mLETEC菌液,CON组和LPL组每只断奶仔猪灌胃等量生理盐水。于试验第22天早晨,所有断奶仔猪麻醉后屠宰采样。
试验结果
正常饲养阶段(1-18d):
(1)与对照组相比,饲粮中添加LPL对断奶仔猪ADG、ADFI以及F/G未产生显著影响(P>0.05),但显著降低了仔猪腹泻率以及腹泻指数(P<0.05)。
(2)与对照组相比,添加LPL的处理组中断奶仔猪的DM、EE、GE、CP及Ash的表观消化率显著提高(P<0.05)。
ETEC攻毒阶段(19-21d):
(1)ETEC攻毒使两个攻毒组断奶仔猪的腹泻指标显著上升(P<0.05),但添加LPL可显著缓解ETEC攻毒造成的腹泻率和腹泻指数上升(P<0.05)。
(2)与CON组和CON+LPL组比,ETEC感染的断奶仔猪盲肠食糜中大肠杆菌数量显著上升(P<0.05);LPL添加可以显著增加盲肠食糜中芽孢杆菌数量(P<0.05),同时可显著改善由于ETEC感染导致的盲肠食糜中乳酸杆菌和芽孢杆菌数量下降(P<0.05)。
(3)ETEC攻毒显著增加断奶仔猪血清中TP的含量(P<0.05),有提高GLB和ALB含量的趋势(0.05<P<0.10)。饲粮添加LPL可显著降低断奶仔猪血清中TG和AST的含量(P<0.05)。
(4)ETEC攻毒会破坏断奶仔猪肠道形态,使小肠绒毛高度显著下降、显著加深肠道隐窝深度并降低肠道绒隐比(P<0.05),但添加LPL可有效缓解肠道形态损伤。
(5)ETEC攻毒会显著降低血清中T-AOC活性(P<0.05),显著增加MDA含量(P<0.05),但添加LPL可明显降低ETEC感染仔猪血清中的MDA水平(<0.05)。添LPL可显著增加回肠SOD的活性以GSH-Px的活性(P<0.05)。
(6)ETEC攻毒会显著增加血清中IL-1β和IL-10的含量(P<0.05),同时添加LPL可显著降低血清中IL-1β和IL-6的含量(P<0.05)。ETEC攻毒会显著增加回肠中IL-6的含量(P<0.05),以及有增加回肠中IL-1β含量的趋势(0.05<P<0.10)。同时添加LPL可显著降低空肠中IL-6的含量(P<0.05),有降低空肠中TNF-α含量的趋势(0.05<P<0.10)。
(7)ETEC攻毒会显著下调空肠中MUC2基因表达水平(P<0.05),显著上调空肠及回肠中CFTR的基因表达水平(P<0.05)。添加LPL可显著上调十二指肠中MUC1、Occludin及LPA5基因的表达水平(P<0.05),显著上调空肠中Occludin、LPA2及LPA5基因的表达水平(P<0.05),显著上调回肠中MUC1、ZO-1、LPA2基因的表达水平(P<0.05),同时有下调CFTR基因表达水平的趋势(0.05<P<0.10)。
综上所述,在正常饲养条件下,断奶仔猪饲粮中添LPL能缓解腹泻症状并能显著提高仔猪的养分表观消化率。ETEC攻毒会造成断奶仔猪肠道健康受损腹泻率增加,同时降低抗氧化能力及免疫功能。断奶仔猪饲粮中添LPL可以善肠道组织形态、增加盲肠中有益菌数量、抑CFTR基因的表达、增强机体氧化能力来缓ETEC感染造成的断奶仔猪腹泻。
原文:杜雯婷.溶血磷脂对大肠杆菌感染仔猪生长性能、免疫功能和肠道健康的影响[D].四川农业大学,2024.DOI:10.27345/d.cnki.gsnyu.2024.000324.
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